Alguns laboratórios reservam um ou mais micropipetadores/pipetadores para cada um de seus usuário; outros, preferem reservar um conjunto ou mais para cada aplicação.

Há vantagens e desvantagens em ambas as estratégias. Optamos pela segunda, pois nos possibilita manter os equipamentos nas melhores condições possíveis para as aplicações para as quais foram destinados. Atualmente temos a seguinte situação:

1. Cultura celular: micropipetas e um pipetador motorizado exclusivas para manipulação de células e meio de cultura. Localização: sala de cultura celular (em estruturação)
2. Eletroforese: para pipetagem de produto de PCR em gel de agarose ou poliacrilamida. Jamais devem ser utilizados para pipetagem de amostras de DNA pré-PCR! Localização: na área pós-PCR, nas gavetas sobre a bancada de eletroforese (ao lado do frigobar).
3. ELISA: micropipetas mono e multicanal (8 canais) para ELISA. Localização: sem local definido no momento (em estruturação)
4. Extração de DNA: para extração de DNA à partir de tecido ou sangue. Localização: nas primeiras gavetas da bancada tetra da área pré-PCR, lado esquerdo.
5. Extração e manipulação de RNA: micropipetas sob rigoroso controle de limpeza para evitar contaminação com RNases. Utilizadas para extração de RNA e para transcrição reversa para RT-PCR. É imprescindível descontaminação dos equipamentos e da área de trabalho com solução inibidora de RNases antes e depois do experimento! Localização: guardados em caixa plástica fechada, junto com os reagentes de manipulação de RNA em armário de solo da área pré-PCR.
6. Imunoistoquímica (IHQ) e hibridação in situ (HIS): utilizados para as reações de IHQ e HIS, bem como para preparação de alíquotas de anticorpos e de reagentes que não requerem cuidados especiais. Também podem ser usados para ELISA. Localização: no lab. auxiliar (sala de hibridação) ou sobre a bancada de eletroforese, na área pós-PCR.
7. Sala de mix de PCR: micropipetas para pipetagem de reagentes/soluções livres de DNA (reagentes gerais ou mix de pCR). Não podem ser utilizados para pipetar amostras de DNA e muito menos produto de PCR. Localização: sala de mix na área pré-PCR.

• Micropipeta de deslocamento positivo: exclusiva nas manipulação de produto de PCR e reações de PCR “aninhada” (Nested-PCR). Localização: capela de manipulação de produto de PCR
• Micropipetas digitais: são usadas prioritariamente para a preparação de PCR em tempo-real. Jamais devem ser usadas com produto de PCR! Localização: sala de mix e cabine de biossegurança (fluxo laminar) na área pré-PCR.
• Micropipeta para quantificação de ácidos nucléicos: para pipetagem de amostras durante a quantificação de DNA com o espectrofotômetro UV. Localização: junto com os acessórios de quantificação, na penúltima gaveta da bancada tetra da área pré-PCR, lado direito.
• Pipetador motorizado de uso geral: para preparação de reagentes em geral. Localização: na área pré-PCR, em uma das estações de trabalho do lado esquerdo da bancada tetra.
• Pipetador eletrônico programável: para extração de ácidos nucléicos e preparação de reagentes. Uso somente por usuários habilitados devidamente autorizados pela coordenação! Localização: na área pré-PCR, em carregador sobre a bancada de canto no fundo da sala.
• Repipetador eletrônico: para preparação de alíquotas de reagentes de biologia molecular. Localização: sala de mix na área pré-PCR.

Contamos com a sua colaboração para que esses equipamentos não sejam utilizados em aplicações diferentes daquelas para as quais foram reservados. Adicionalmente, os equipamentos não podem ser usados em áreas diferente daquelas em que são guardados (e.g., equipamentos da área pré-PCR na área pós-PCR e vice-e-versa; equipamentos de cultura celular fora da sala de cultura). A única exceção até o momento são as micropipetas de IHQ/HIS, que podem ser usadas tanto no laboratório auxiliar (“sala de hibridação”) como na área pós-PCR do laboratório principal.

Em caso de problemas com um pipetador ou micropipetador, não utilize um substituto sem antes consultar um membro mais experiente do grupo ou a coordenação. Adicionalmente, não esqueça de informar a coordenação sobre o problema para que sejam tomadas as providências cabíveis.

© ViriCan | Grupo de Estudos em Carcinogênese Viral e Biologia dos Cânceres, UNESP. Botucatu, SP, Brasil. info@virican.net