~~BARCODE~class=barcode_right~url=https://wiki.virican.net/doku.php?id=p-0071~size=S~~

Recuperação de amostras de células criopreservadas do tanque de nitrogênio líquido (NLíq)

Alojamento do tanque de NLíq, na antesala das câmaras frias (IBTEC - Setor V)

1. Óculos de proteção ou faceshield
2. Luvas de proteção térmica
3. Garrafa térmica ou equivalente

ATENÇÃO: O procedimento deve ser realizado com adequada ventilação do ambiente e uso dos seguintes EPIs por quem realiza: jaleco, luvas de proteção térmica e óculos de proteção (ou máscara facial - faceshield).

1. Retirar a tampa de vedação do tanque de Nlíq;
2. Inserir o bastão com marcação de referência de preenchimento de Nlíq;
3. Aguardar 1min, retirar o bastão do tanque e verificar a marcação pela formação de gelo no bastão;
4. De acordo com a marcação obtida: 50% ou mais - seguir o procedimento sem restrições; 30-50% - realizar apenas procedimento rápido de retirada de amostra; Abaixo de 30% - adiar o procedimento e notificar os técnicos para reposição imediata de NLíq.

1. Com a concha própria para coleta de NLíq, transferir NLíq para a garrafa térmica para resfriamento interno inicial;
2. Efetuar movimentos circulares na garrafa térmica para o NLíq resfriar homogeneamente as superfícies internas da garrafa;
3. Completar a garrafa com NLíq em até aproximadamente 50% de seu volume, no máximo;

1. Localizar o rack que se deseja utilizar;
2. Segurando o o rack por sua alça, elevá-lo até a porção inferior estar nivelada com a abertura do tanque;
3. Inclinar o rack para frente por alguns instantes, para remoção de NLíq acumulado no rack;
4. Repetir o proccedimento com o rack inclinado para trás;
5. Mover o rack para a superfície de trabalho;
6. Retirar a trava do rack e colocá-la em lugar bem visível, para recolocação ao final do procedimento;
7. Localizar a caixa desejada, removê-la do rack e depositá-la sobre a superfície de trabalho;
8. Abrir a caixa e aguardar alguns instantes, para evitar acidentes pelo lançamento abrupto de NLíq das tampas dos criovials;
9. Com uma pinça, localizar o criovial que se deseja remover da caixa;
10. Transferir o criovial para a garrafa térmica;
11. Repetir o procedimento para cada criovial adicional que se pretende retirar da mesma caixa ou do mesmo rack;
12. Ao concluir a retirada de amostras do rack, reinserir qualquer caixa utilizada (devidamente fechada) em sua respectiva posição;
13. IMPORTANTE: reinserrir a trava de segurança do rack;
14. Retornar o rack utilizado à sua devida posição no tanque de NLíq;
15. Se necessárias amostras de outra localização, repetir o procedimento desde a retirada do rack do tanque;

ATENÇÃO:

• Sempre verificar se os racks estão com as devidas travas de segurança antes de retorná-los ao tanque, de modo a evitar evitando perda de materiais em seu interior.

• A manipulação do nitrogênio líquido deve sempre ser realizada com a porta da ante-sala das câmaras frias aberta, para ampla ventilação;
• Evitar manipular as caixas ou amostras próximas ao rosto e nunca fazê-lo sem o uso do óculos de proteção ou faceshield.

• A devida organização das amostras nas caixas e estas nas suas respectivas posições nos racks é essencial para fácil localização do que se precisa remover, reduzindo substancialmente o tempo de manipulação do tanque de NLíq.