Estabelecer as diretrizes de operação padrão, calibração operacional, limpeza e manutenção preventiva da Centrífuga de Bancada Multiuso DLab DM0636 no Setor de Cultura Celular do IBTEC, visando salvaguardar a integridade física do operador e a integridade das amostras biológicas processadas.

A centrifugação baseia-se na aplicação de uma força centrífuga rotacional para acelerar a sedimentação de fases com densidades distintas em uma suspensão (como células e detritos celulares em meios de cultura). A centrífuga DLab DM0636 é um equipamento de alta performance com motor de indução livre de escovas, operando com controle rigoroso de velocidade, tempo e rampas de aceleração/desaceleração. O correto equilíbrio dinâmico e estático de massas simétricas no rotor é crucial para evitar o desalinhamento do eixo motor, oscilações severas e desgaste prematuro dos amortecedores internos. O controle estrito de danos estruturais, a prevenção ativa contra a geração de aerossóis nocivos e o correto manejo de falhas mecânicas/quebras de tubos constituem as bases operacionais de proteção à saúde coletiva laboratorial.

Locais de execução do procedimento no IBTEC, UNESP:

• Laboratório de Cultura Celular (Setor L)

• Centrífuga de Bancada DLab DM0636 (Setor L1) com rotor livre oscilante (swing-out)
• Adaptadores de rotor para tubos cônicos de 15 mL e 50 mL (tipo “Falcon”).

1. Inspecione visualmente se o equipamento está assentado de forma estável sobre a bancada plana e firme.
2. Verifique o cabo de energia e certifique-se de que não há torções ou danos físicos aparentes.
3. Certifique-se de que a câmara interna de centrifugação e o rotor estejam limpos, secos e livres de poeira ou resíduos salinos persistentes.

1. 🚨 CRÍTICO: Nunca execute a centrifugação sem verificar equilíbrio preciso dos volumes. O peso das caçapas opostas e de seus respectivos tubos e adaptadores deve ser idêntico.
2. ⚠️ ATENÇÃO: Adote uma margem máxima tolerável de diferença de peso de ± 0,1 g entre pares diametralmente opostos.
3. Se necessário, prepare um tubo Falcon correspondente contendo água destilada até atingir a massa idêntica à do tubo de amostra.
4. Ao carregar os tubos, coloque-os de forma estritamente simétrica (180 graus de oposição no rotor), de modo que o centro de gravidade mecânico permaneça perfeitamente centralizado no eixo motor.

1. Ligue o interruptor principal de energia localizado no painel lateral (à direita) da máquina.
2. Pressione o botão de abertura de tampa (Door).
3. Encaixe os adaptadores corretos nas caçapas para os tubos a serem centrifugados (15 mL ou 50 mL).
4. Insira as amostras devidamente pareadas no rotor.
5. Caso utilize caçapas herméticas (tampas de biossegurança), rosqueie-as firmemente antes de iniciar.
6. Feche a tampa do equipamento exercendo pressão suave por pelo menos 5 s para travamento elétrico.
7. Ajuste de Parâmetros de Corrida:
   • Velocidade: Pressione o botão seletor de velocidade e use o botão rotativo central para ajustar. ⚠️ ATENÇÃO: configure a centrifugação empregando unidade RCF (xg). Se o display exibir RPM, aperte duas vezes o botão seletor para mudança da velocidade para RCF.
   • Tempo: Utilize o botão seletor de tempo de corrida e gire o botão de controle para configurar o tempo necessário.
   • Rampa de Aceleração (ACC) / Desaceleração (DEC): Apenas se necessário, utilize os botões <ACC> e <DEC> para definir a taxa de aceleração e frenagem (valores de 1 a 9). Habitualmente os tempos são definidos em 5 para ambos os parâmetros. ⚠️ ATENÇÃO: para separação de células íntegras em gradientes de densidade (e.g., Ficoll), utilize desaceleração suave (DEC 1) para evitar ressuspensão do pellet ao final da centrifugação.
8. Modos de Operação Especiais:
   • Modo Pulsar: Para spins rápidos de curta duração, mantenha pressionada a tecla <Pulse>. O rotor acelerará continuamente até a velocidade máxima configurada e começará a desacelerar imediatamente após o operador soltar a tecla.
   • Programas Salvos: Para corrida com configurações pré-estabelecidas, selecione o atalho do programa pressionando a tecla <Prog>.

1. Pressione o botão <Start/Stop> para iniciar o ciclo.
2. ⏸️ Pausa Obrigatória: Permaneça ao lado da centrífuga durante o primeiro minuto de aceleração. Caso escute qualquer ruído incomum, vibração mecânica excessiva ou estalos, pressione IMEDIATAMENTE o botão <Start/Stop> para interromper a rotação.
3. 🚨 CRÍTICO: Sob nenhuma hipótese tente forçar a abertura mecânica da tampa ou inclinar o equipamento durante a rotação ativa do rotor.
4. Ao término do tempo configurado, a frenagem iniciará automaticamente de acordo com o gradiente (DEC) selecionado.
5. Aguarde a desaceleração completa até que a velocidade marque “0” no display e o aviso luminoso ou sonoro indique que a tampa foi liberada pelo sistema de travamento elétrico.
6. Pressione <Door>, abra a tampa e retire as amostras de maneira suave para não perturbar o pellet sedimentado.
7. Avalie visualmente os tubos para checar se houve fraturas, lise ou vazamento do material.

1. Efetue a limpeza da parte interna das caçapas e do rotor utilizando papel absorvente ou gaze limpa levemente umedecida com etanol 70%.
2. 🚨 CRÍTICO: Nunca utilize soluções de hipoclorito de sódio ou produtos ácidos abrasivos para a limpeza do rotor de alumínio, pois causam microporosidades de corrosão que fragilizam o metal, predispondo à ruptura por estresse mecânico.
3. Após a finalização das atividades do dia, mantenha a tampa da centrífuga ligeiramente aberta para permitir que toda a umidade residual se dissipe, prevenindo o acúmulo de condensação e o surgimento de contaminações fúngicas.

• ☣️ Risco Biológico e Aerossóis: Em caso de suspeita de quebra de tubo contendo amostra biológica Classe II durante a centrifugação, desligue imediatamente o equipamento. Não abra a tampa e aguarde por pelo menos ⏳ 30 min para a deposição dos aerossóis gerados antes de iniciar a descontaminação biológica.
• ☀️ Riscos Físicos e Mecânicos: Nunca opere o equipamento com o rotor desbalanceado, trincado ou sem a totalidade das caçapas correspondentes encaixadas. O desalinhamento severo em alta velocidade pode causar falhas mecânicas catastróficas e projeção de fragmentos.
• ⚡ Risco Elétrico: Antes de efetuar qualquer etapa de limpeza profunda, lubrificação interna dos eixos de suspensão ou intervenção mecânica, retire o cabo de alimentação da tomada da parede de forma a prevenir descargas acidentais.

1. Manutenção Periódica: Recomenda-se realizar a limpeza técnica profunda e lubrificação fina dos pinos de suporte do rotor oscilante (caçapas swing-out) com graxa à base de silicone a cada 6 meses para assegurar que as caçapas rotacionem de forma fluida durante a transição horizontal.
2. Rastreabilidade de Uso: Registre obrigatoriamente os incidentes de utilização da centrífuga (usuário, data, velocidade, tempo e tipo de amostra) no sistema de uso de equipamentos multiusuário disponível em https://unbt.cc/ibtec-eqp.

© ViriCan | Grupo de Estudos em Carcinogênese Viral e Biologia dos Cânceres, UNESP. Botucatu, São Paulo, Brasil. info@virican.net